新的超分辨率显微镜方法接近原子尺度

为了以高分辨率研究蛋白质和其他生物分子，研究人员长期以来一直依赖两种技术：X 射线晶体学和冷冻电子显微镜。虽然这两种方法都可以确定分子结构，直到单个原子的分辨率，但它们是在分子支架上确定的，或者在超低温下冷冻，可能会改变它们的正常生理形状。原子力显微镜(AFM)可以在正常生理条件下分析生物分子，但所得图像模糊且分辨率低。

“原子力显微镜可以轻松解析物理学中、硅酸盐固体表面和半导体上的原子，因此这意味着机器原则上具有做到这一点的精度，”资深作者、生理学和生物物理学教授 Simon Scheuring 博士说。威尔康奈尔医学院的麻醉学。“这项技术有点像你拿笔扫描落基山脉，这样你就能得到物体的地形图。实际上，我们的笔是一根针，锋利到几个原子，而物体是单个蛋白质分子。”

然而，生物分子有许多摆动的小部分，模糊了它们的 AFM 图像。为了解决这个问题，Scheuring 博士和他的同事们采用了一种来自光学显微镜的概念，称为超分辨率显微镜。“从理论上讲，光学显微镜不可能分辨距离小于光波长一半的两个荧光分子，”他说。然而，通过刺激相邻分子在不同时间发出荧光，显微镜师可以分析每个分子的扩散并高精度地确定它们的位置。

Scheuring 博士的团队指出，在 AFM 扫描过程中记录的生物分子的自然波动产生了类似的位置数据传播，而不是刺激荧光。第一作者 George Heath 博士，在研究时是威尔康奈尔医学院的博士后助理，现在是利兹大学的教员，从事实验和计算模拟的循环，以更深入地了解 AFM 成像过程。从尖端和样品之间的原子相互作用中详细提取并提取最大信息。

使用超分辨率分析等方法，他们能够提取运动分子的更高分辨率图像。继续地形类比，Scheuring 博士解释说，“如果岩石(即原子)上下摆动一点，你可以检测到这个，然后那个，然后你随着时间的推移对所有检测进行平均，你会收到高 -分辨率信息。”

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